離子排斥色譜柱上基本都有->標(biāo)志,表示流動(dòng)相的流動(dòng)方向,有的在色譜柱上印有“Nerver Lot Flow in the OppositeDirection”字樣,翻譯成“決不能反沖”的意思,色譜柱可以反沖嗎、色譜柱能不能反沖的問(wèn)題爭(zhēng)議很大,但在我們工作中,用色譜柱反沖技術(shù)修復(fù)色譜柱收到柱效提高、柱效恢復(fù)的效果。
離子排斥色譜柱使用一段時(shí)間后柱效下降,此時(shí)可拆下柱入口端螺帽,去掉1-2mm被污染填料,再用相同填料填滿,然后用流動(dòng)相反沖一下,可使柱效恢復(fù),因反沖可以改善柱頭死空間。
因反沖可把沉積在過(guò)渡板上的細(xì)微顆粒沖走,有時(shí)也可用反沖技術(shù)使柱壓降低。
一些反沖離子排斥色譜柱的方法:
1:如果是已經(jīng)保存好的色譜柱:1.反向接柱,先用 95 水:5 乙腈 0.2 ml/min,沖 20 倍柱體積;然后用四氫呋喃,0.2 ml/min,沖 20 倍柱體積;zui后用 95 乙腈:5 水,0.2 ml/min,沖 20 倍柱體積;2.正向接柱,用 65乙腈水保存色譜柱。
二.如果是剛走完樣的色譜柱,那么請(qǐng)按照下列步驟進(jìn)行:1.卸掉保護(hù)柱2.正向接柱,常規(guī)方法沖洗色譜柱(先 95水,后 95 乙腈或甲醇);3.反向接柱,先用 95 水:5 乙腈 0.2 ml/min,沖 20 倍柱體積;然后用四氫呋喃,0.2 ml/min,沖 20 倍柱體積;zui后用 95 乙腈:5 水,0.2ml/min,沖 20 倍柱體積;4.正向接柱,用 65乙腈水保存色譜柱。
注意:1.20 倍柱體積:2504.6mm 大概 80ml 1504.6mm 大概 48ml2.反向接柱時(shí)不要接檢測(cè)器!